荧光显微镜

1.广角目镜2.消色差物镜4.四孔物镜转换器4.下降荧光装置蓝色(B)绿色(G)励磁系统100W水银灯5.同轴粗调微动聚焦机构:聚焦范围15 mm微动值0.002 mm 6.双层机械工作台纵向移动范围:70 mm横向移动范围:50 mm(1)滑动玻璃滑块厚度应介于0.8和1.2 mm之间,坡度过厚,一方面,光吸收更多,另一方面,激发光不能聚集在试样上。

载玻片必须光滑,厚度均匀,无自发荧光。

有时使用石英玻璃载玻片。

(2)盖玻片盖玻片的厚度约为0.17mm,光滑洁净。

为了增强激发光,还可以使用干涉覆盖玻璃,这是一种特殊的覆盖玻璃,在不同波长的光(如氟化镁)上涂有几层不同的干涉效应,可以产生荧光平滑。

通过并反射激发光,反射的激发光可以激发样本。

(III)标本组织切片或其他标本不应太厚。

例如,太大的激发光主要在样本的下部消耗,而由物镜直接观察的上部没有被充分激发。

另外,细胞重叠或杂质掩蔽影响判断。

(四)密封剂密封剂常用甘油,必须无自发荧光,无色透明,荧光亮度在pH 8.5~9.5时更亮,不易褪色。

因此,使用等量的甘油和0.5mol / l的pH为9.0至9.5的碳酸盐缓冲液作为密封剂。

(5)镜油通常,暗视野荧光显微镜和油镜观察样品必须使用镜油。

最好使用特殊的非荧光油,或使用上述甘油代替。

也可以使用液体石蜡,但折射率低。

对图像质量有轻微影响。

荧光显微镜使用具有高发光效率的点光源来发射特定波长的光(例如紫外光3650或紫蓝色4200)作为激发光,并且激发样品中的荧光物质发出各种颜色。

荧光后,通过物镜和目镜的放大观察。

这样,在强烈的对比背景下,即使荧光非常弱,也易于识别并具有高灵敏度,主要用于细胞结构和功能以及化学成分的研究。

荧光显微镜的基本结构包括常见的光学显微镜和一些附件(例如荧光光源,激发滤光片,双色分束器和阻挡滤光片)。

荧光光源 - 一般使用超高压汞灯(50-200W),可以发出各种波长的光,但每种荧光物质都有一束激发光,产生最强的荧光,所以有必要增加激发滤光片(通常,有紫外线,紫色,蓝色和绿色激发滤光片),只有一定波长的激发光透过被照射的样品,其他光被吸收。

在用激发光照射每种物质后,它在非常短的时间内发射比照射波长更长的可见荧光。

荧光是特异性的并且通常比激发光弱。

为了观察特定荧光,在物镜后添加阻挡(或抑制)滤光器。

它有两个功能:一个是吸收和阻挡激发光进入目镜,以避免干扰荧光和损害眼睛,另一个是选择并允许特定荧光通过,显示特定的荧光颜色。

必须选择两个过滤器才能使用。

1.照射模式通常为喷雾型,即光源通过物镜投射到样品上; 2.光源为紫外光,波长较短,分辨率高于普通显微镜; 3.有两个特殊的滤光片,在光源之前用于滤除可见光,目镜和物镜之间用于滤除紫外线以保护眼睛。

荧光显微镜也是一种光学显微镜。

主要区别在于两者的激发波长不同。

这决定了荧光显微镜和普通光学显微镜的结构和使用方法之间的差异。

荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。

它由光源的主要部件,滤板系统和光学系统组成。

荧光被一定波长的光激发,并通过物镜和目镜系统放大,以观察样品的荧光图像。